兔胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒   

四大特性：    

1．特異性強：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

2．重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

3．穩(wěn)定性高： 實驗效果很穩(wěn)定。

4．超靈敏度：檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

ELISA優(yōu)化加樣需要注意哪些

   科研ELISA在國內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA 、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。

ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化：在這一進程中，一般情況下有三次加樣，它們分別是加標(biāo)本，加酶物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上劇烈振動。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標(biāo)本，然后在微型顫動器上顫動1分鐘以確?；旌?。

一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，跨過一星期測定的需低溫冰存。

1、血清：用無菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。

2、尿液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

3、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。

4、胸腹水：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

5、腦脊液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

6、唾液：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

7、細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

8、牛奶：用無菌管搜集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），細(xì)心搜集上清，保存過程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

如何使用ELISA試劑盒

如：加樣器不確，尤其10ul以下的加樣器，對結(jié)果影響大、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范。如何解決這些問題呢，下面為您介紹以下幾點使用方法：

1．在使用過程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進口產(chǎn)品（芬蘭、法國等）；

2．仔細(xì)校正溫度到37℃，水浴箱為佳；

3．必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等。

4．認(rèn)真閱讀使用說明書。

5．樣品加樣

（1）加樣時一定要仔細(xì)。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。

（2）加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。

6．洗滌

（1）每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；

（2）選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；

（3）可選用塑料洗滌瓶。

7．加酶反應(yīng)

（1）包括陰性對照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；

（2）包括陽性對照在內(nèi)，各孔均無顯色；

（3）陽性對照不顯色，而其它樣本顯色正常；

（4）有些標(biāo)本顯色不深，判斷陽性困難。

兔胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒   

ELISA試劑盒在使用之時還需要注意哪些問題？

1. elisa試劑盒應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。elisa試劑盒不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物a、b液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7. 底物a應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物b對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取od值。

8. 加入elisa試劑盒的順序應(yīng)一致，elisa試劑盒以所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

9. 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

科研ELISA檢測過程中的注意事項

1、要移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但*有專業(yè)人員進行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。

3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果穩(wěn)定。

4、實驗時，要使底物避光保存。

5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

7、將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

8、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

9、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

10、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。

11、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

12、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。

13、檢測前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。

14、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。

15、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。

16、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。

17、應(yīng)盡量做雙孔實驗，這樣才能數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

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免責(zé)聲明

試劑盒供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。

嚴(yán)格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。