冷凍細胞凍結程序: 

        根據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單之基礎培育基品種、血清品種和其它之成份和份額，制備培育基。絕大多數(shù)之細胞均無法當即習慣不同之基礎培育基或不同之血清品種，若因試驗需要，有必要有所不同時，必須以緩慢份額逐步改動培育基組成，斷定細胞習慣后，方進行所需之試驗。

        FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異極大，請必須根據(jù)細胞株資料單之血清品種培育之。

        將培育基置于37 °C 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦洗之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，當即放入37 °C 水槽中快速凍結，水面高度不行挨近或高過冷凍管之蓋沿，不然易發(fā)作污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后，以70 % ethanol 擦洗冷凍管外部，移入無菌操作臺內。

根據(jù)細胞品種和濃度，于無菌操作臺內取10 ml 培育基加至T25 或T75 flask中。取出已凍結之細胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內之培育基，混合均勻，放入37 °C，5 % CO2 培育箱培育。