蛋白免疫印跡（WB）樣本準(zhǔn)備要求

蛋白免疫印跡（Western Blot）是將組織或細(xì)胞總蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后轉(zhuǎn)移到NC膜或PVDF膜上，然后利用特異性抗體檢測(cè)某特定抗原的一種蛋白檢測(cè)技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于蛋白表達(dá)檢測(cè)、抗體活性檢測(cè)及疾病早期診斷等多個(gè)領(lǐng)域。

樣本準(zhǔn)備要求：

組織樣本：組織1cm×1cm×1cm大小，冰上取材，用生理鹽水洗凈去除和污物，并剔除非研究所需的組織，放入已標(biāo)記的凍存管中，液氮速凍后，轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱保存，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞樣本：培養(yǎng)好的細(xì)胞用細(xì)胞刮刮下或胰酶消化，離心收集細(xì)胞團(tuán)，細(xì)胞團(tuán)要求1×107 如米?；螯S豆大小，液氮速凍后放入-80 ℃冰箱中保存，干冰運(yùn)輸。

全血樣本:肝素鈉（綠頭）或EDTA（紫頭）抗凝管采集全血1ml，上下顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻，1h之內(nèi)進(jìn)行白細(xì)胞提取，細(xì)胞團(tuán)要求 1×107 如米?；螯S豆大小，液氮速凍后放入-80 ℃冰箱中保存，干冰運(yùn)輸。

蛋白提取液：總蛋白濃度（細(xì)胞不低于3μg/μl，組織不低于5μg/μl）。

注意：提取后的蛋白建議經(jīng)過(guò)濃度測(cè)定，再進(jìn)行變性，變性時(shí)先加入Sample buffer，再95℃ 水浴10min，緩慢恢復(fù)至室溫后離心。變性的蛋白可直接超低溫保存（-80℃冰箱保存或干冰運(yùn)輸）。