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抗凝馬血(無菌 袋裝)
用法
: 血清由冰凍狀態(tài)在常溫下融化成液體,搖均勻后放置 10-30 分鐘待結(jié)塊蛋白質(zhì)沉底后即可 使用。
注意事項:
有少量蛋白質(zhì)結(jié)塊析出不影響使用。未融化或融化未經(jīng)搖勻的血清禁止直接放入高溫水浴內(nèi)加溫。減少血清重復凍融。血清在室溫或 4 ℃ 冰箱內(nèi)放置過久會影響促細胞生長效果。
抗凝馬血(無菌 袋裝) 的解凍:
將血清從冰凍區(qū)中取出后(切勿直接將血清從 -20 ℃ 進入 37 ℃ 解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 區(qū)域中使之融化,然后在室溫下使之全融。使用前再預溫到將使用的溫度(如 37 ℃ ),但必須注意的是,解凍過程中應(yīng)輕輕地搖晃均勻。血清在解凍過程中可能會出現(xiàn)少量絮狀或片狀析出物,主要是血清中脂蛋白的變性或是纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但這些析出物,并不影響血清本身的質(zhì)量。 若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
抗凝馬血的主要作用:
●提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質(zhì)。
●提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(*******、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。
●提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。
●提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。
●對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用,如SeO3,硒等。
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